色譜柱是色譜系統(tǒng)的“心臟”。本文試著從液相色譜柱的填料和載體、相關(guān)理論公式、色譜柱的選擇和分類(lèi)等方面系統(tǒng)解讀液相色譜柱,讓讀者對(duì)于液相色譜柱有一個(gè)較為全面的了解。
液相色譜技術(shù)是目前最有用和使用最廣泛的應(yīng)用分析技術(shù)。其發(fā)展歷史概略如下:
- 1900年早期,由M.S.Tsweet發(fā)明了紙色譜法;
- 1930年早期,色譜理論進(jìn)一步得到發(fā)展;
- 1940年早期,A.J.P.Martin發(fā)明了分配色譜和紙色譜法;
- 1950年晚期,S.Moore和W.S.Stein發(fā)明了氨基酸的分析儀;
- 1960年早期,Waters公司發(fā)明了凝膠滲透色譜法;
至此,液相色譜理論和相關(guān)技術(shù)開(kāi)始起步和發(fā)展。色譜柱是液相色譜發(fā)展的關(guān)鍵屬性,是色譜系統(tǒng)的心臟。1941年,Martin報(bào)道說(shuō):“最有效的色譜柱應(yīng)該通過(guò)較小粒徑、較小的填料以及利用色譜柱內(nèi)部存在壓力差來(lái)獲得”。經(jīng)過(guò)近六十年的理論和技術(shù)的發(fā)展,今天幾乎已經(jīng)不太可能會(huì)出現(xiàn)那種無(wú)法找到柱子來(lái)解決一個(gè)特定的HPLC分離實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題。色譜柱內(nèi)部的填充包含有固相載體和一個(gè)附著的固定相。固相載體常見(jiàn)的材料是二氧化硅,其它較少應(yīng)用的有聚合物:聚苯二烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂;還有氧化鋯、二氧化鈦或氧化鋁,石墨化碳等。對(duì)于二氧化硅載體,常用的顆粒類(lèi)型是完全多孔的硅膠顆粒,其次是表面多孔顆粒,薄殼型顆粒,和灌注顆粒。前兩者主要用于小分子的分離與制備,后兩者常用于大分子的分離與制備。硅膠顆粒的粒徑大小一般在1.5μm-5.0μm范圍??讖酱笮?nm-12nm用于小分子分離,15-100nm用于大分子分離。硅膠整體柱是另一種載體,不同于上面的顆粒。它是由一個(gè)內(nèi)部連接的多孔床組成,是以一塊多孔的硅膠為基礎(chǔ)制備得到的。孔的直徑一般有2μm 和10nm兩種。表1*:HPLC固定相中的常見(jiàn)官能團(tuán)
官能團(tuán) | 模式 | 注釋 |
C3,C4,C5, | RPC | 用于分離蛋白質(zhì) |
C8,C18 | RPC | 最常用的柱子,用于小分子化合物;相近的保留能力和選擇性 |
C30 | RPC | 主要用于胡蘿卜素的分離 |
苯基 | RPC | 常見(jiàn)柱子,主要用于改變選擇性 |
嵌入極性基團(tuán)(酰胺、氨基甲酸鹽、尿素) | RPC | 常用的柱子,主要與含水比例較高的流動(dòng)相共用,以提高堿性溶質(zhì)分子的峰形,或者改變選擇性 |
高氟苯酚(PFP) | RPC | 較少用的柱子,主要用于改變選擇性 |
氰基 | RPC,NPC | 較少用的柱子 |
NH2 | RPC,NPC,IEC | 較少用的柱子 |
雙醇 | RP,NP,SEC | 主要用于在SEC分離 |
WAX,WCX,SAX,SCX | IEC | 主要用于分離無(wú)機(jī)離子或者較大的生物分子 |
*固定相組成的詳情可參考第5部分。
色譜柱的選擇性與固定固的屬性和連接方式有密切關(guān)系。載體和鍵合相之間的連接方式有多種,第一種是硅烷-硅烷鍵合技術(shù)有單鍵、雙鍵、三鍵和雙齒鍵合四種技術(shù),使用多鍵鍵合可提高固定相在低pH條件下的穩(wěn)定性;第二種是硅膠封端技術(shù),可以提高填料在堿性條件下的穩(wěn)定性,改善極性化合物和堿性化合物的峰形;第三種是在硅膠表面引入甲基、異丙基或異丁基等烷基,起空間位阻保護(hù)作用,避免在低pH條件下O-Si鍵的斷裂;第四種是嵌入極性基團(tuán),提高固定相的親水性和選擇性;第五種是引入帶電填料顆粒,在色譜柱上實(shí)現(xiàn)多種分離機(jī)理。溶質(zhì)分子在色譜柱上的保留是由溶質(zhì)分子、固定相和流動(dòng)相之間的相互作用決定的。它們之間的相互作用包括:①疏水性作用;②固定相對(duì)較大分子的空間排阻作用;③固定相與溶質(zhì)分子間的氫鍵作用;④固定相與溶質(zhì)離子間的靜電相互作用;⑤偶極溶質(zhì)分子與固定相間的偶極作用;⑥芳香溶質(zhì)分子苯基柱,或者腈基柱間的π-π作用;⑦螯合的溶質(zhì)分子與固定相表面的金屬污染物形成復(fù)合物。色譜柱是HPLC分離的核心參數(shù),HPLC的分模式有以下幾種,見(jiàn)表2。
色譜模式 | 注釋 |
反相色譜法 | 色譜柱是非極性的,流動(dòng)相是水和有機(jī)相 |
正相色譜法 | 色譜柱是極性的(如未鍵合的硅膠顆粒),由極性較弱的有機(jī)溶劑組成流動(dòng)相 |
非水反相色譜法 | 色譜柱是非極性的,由有機(jī)溶劑混合組成流動(dòng)相;主要用于疏水性強(qiáng)、不溶于水的樣品 |
親水作用色譜法 | 色譜柱是極性的,由水和有機(jī)溶劑混合為流動(dòng)相 |
離子交換色譜法 | 色譜柱含有帶電的官能團(tuán),鍵合帶有相反電荷的樣品離子,流動(dòng)相是鹽的水溶劑和緩沖液;可分離生物大分子 |
離子對(duì)色譜法 | 同上述反相色譜,流動(dòng)相中加入能與帶有相反電荷的樣品離子作用的離子對(duì)試劑 |
尺寸排阻色譜法 | 惰性色譜柱與水性或有機(jī)的流動(dòng)相工作;基于分子量的大小分離,用于生物大分子或聚合物 |
色譜柱的條件包括色譜柱的長(zhǎng)度、直徑、填充顆粒的大小和流動(dòng)相的速率,這些條件決定了色譜柱的理論塔板數(shù)、分離時(shí)間和柱子壓力。與色譜相相關(guān)的公式有三個(gè)。

適用于高斯色譜峰,N代表色譜柱理論塔板數(shù),是色譜柱柱效衡量的參數(shù)。
為溶質(zhì)的保留時(shí)間,W是溶質(zhì)峰在基線處的峰寬。保留時(shí)間越長(zhǎng),N越大;反之,峰寬越大,N越小。N的大小取決于柱填料性質(zhì)、柱內(nèi)徑、柱長(zhǎng)度和溶質(zhì)分子的性質(zhì)等。
理論塔板數(shù)也可用下面等式估測(cè):
, L代表色譜柱的長(zhǎng)度,
為顆粒直徑。理論上講,柱子越長(zhǎng),柱塔板數(shù)越高;顆徑越小,柱塔板數(shù)越高。
第二個(gè)公式是Van Deemter方程:H=A+Blu+Cu,H為總色譜峰譜帶展寬,A為縱向(柱外)擴(kuò)展因素引起的譜加寬;Blu為渦流擴(kuò)散因素引起的譜加寬,由填充顆粒的排列方式?jīng)Q定;Cu為固定相的溶質(zhì)轉(zhuǎn)移因素引起的譜加寬;對(duì)于已知的溶質(zhì)和色譜柱,A、B和C是固定的常數(shù)。由第一個(gè)公式可以看出,溶質(zhì)分子譜帶展寬會(huì)影響色譜柱的N,因此在保持tR一定的條件下,如何減少溶質(zhì)分子的譜帶加寬,是提高色譜柱柱效要考慮的主要因素。

Rs代表峰與峰之間的分離度;
代表兩個(gè)色譜峰的保留時(shí)間之差;
代表兩個(gè)色譜峰在基線處峰寬的之差。色譜峰間的保留時(shí)間差越大,分離度越大;峰寬之差越小,分離度越大。該公式與第一個(gè)公式的注釋類(lèi)似,用保留時(shí)間和峰寬進(jìn)行計(jì)算,取決于柱填料性質(zhì)、柱內(nèi)徑、柱長(zhǎng)度和溶質(zhì)分子的性質(zhì)等。
液相色譜柱的分類(lèi)在USP中已經(jīng)更新到了L120,每類(lèi)色譜柱主要包含色譜的填料和鍵合相種類(lèi),以及填料的直徑或者孔徑等信息。需要注意的是,在USP中每類(lèi)色譜柱的描述下面會(huì)有廠家品牌的具體色譜柱清單,但該清單不作為USP推薦,僅用于分析工作者的參考。無(wú)論是在附錄、更新版的USP-NF中,還是在修訂公告或臨時(shí)修訂公告中,只有當(dāng)提及色譜柱的文本成為正式文本時(shí),新柱子的名稱(chēng)才會(huì)收到一個(gè)編號(hào)。在藥典論壇的提案期間,新的色譜柱將在數(shù)據(jù)庫(kù)中用“L”、“G”或“S”標(biāo)識(shí),后面是專(zhuān)著標(biāo)題和括號(hào)中的柱品牌名稱(chēng)。在提案期間,不會(huì)為其指定編號(hào)。L1:十八烷基硅烷化學(xué)鍵合到多孔二氧化硅微粒上,直徑1.5至10μm,或?yàn)檎w柱。L2:十八烷基硅烷化學(xué)鍵合到硅膠上,表面孔隙直徑為30至50μm的實(shí)心球芯。L3:多孔二氧化硅顆粒,直徑1.5-10μm,或?yàn)檎w柱。L4:可控表面多孔硅膠鍵合到一個(gè)直徑為30~50μm的實(shí)心球芯上。L6:強(qiáng)陽(yáng)離子交換填料,在直徑30至50μm的實(shí)心球形芯上涂有磺化氟碳聚合物。L7:八烷基硅烷化學(xué)鍵合到直徑為1.5至10μm的完全多孔或表面多孔的二氧化硅顆粒,或?yàn)檎w柱。L8:氨基丙基硅烷化學(xué)鍵合到1.5至10μm的完全多孔硅膠載體,或?yàn)檎w柱。L9:不規(guī)則或球形的完全多孔硅膠,具有化學(xué)鍵合、強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換涂層,直徑為3~10μm。L10:丁腈基化學(xué)結(jié)合到多孔硅膠顆粒1.5到10μm直徑,或?yàn)檎w柱。L11:苯基化學(xué)鍵合到1.5到10μm直徑的多孔二氧化硅顆粒,或?yàn)檎w柱。L12:一種強(qiáng)陰離子交換填料,通過(guò)季胺類(lèi)化學(xué)鍵合到直徑為30至50μm二氧化硅實(shí)球形芯上。L13:三甲基硅烷與直徑為3至10μm的多孔二氧化硅顆?;瘜W(xué)結(jié)合。L14:具有化學(xué)鍵合強(qiáng)堿性季銨陰離子交換涂層的硅膠,直徑為5~10μm。L15:六烷基鍵合到全多孔二氧化硅顆粒上,直徑3-10μm。L16:二甲基硅烷與多孔二氧化硅顆?;瘜W(xué)鍵合,直徑5-10μmL17:由磺化交聯(lián)苯乙烯-二乙烯基苯共聚物組成的強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,氫型,直徑6-12μm。L18:氨基和氰基化學(xué)鍵合到多孔二氧化硅顆粒上,直徑3-10μm。L19:強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由磺化交聯(lián)的苯乙烯-二乙烯苯共聚物組成,鈣型,直徑5-15 ??m。L20:二氫丙烷基與多孔二氧化硅顆粒化學(xué)鍵合,直徑1.5到1μm,或?yàn)檎w柱。L21:一種剛性球形苯乙烯-二乙烯苯共聚物,直徑3至30μm。L22:陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為多孔聚苯乙烯凝膠,含磺酸基,直徑為5~15μm。L23:一種陰離子交換樹(shù)脂,由多孔聚甲基丙烯酸酯或聚丙烯酸酯凝膠制成,具有7~12μm的季銨基團(tuán)。L24:聚乙烯醇與多孔二氧化硅顆?;瘜W(xué)鍵合,直徑5μm。L25:用于中性、陰離子和陽(yáng)離子水溶性聚合物的填料,其分子量在100-5000之間(由聚氧化乙烯測(cè)定)。結(jié)果表明,用聚羥基醚(表面含有一些殘余羧基官能團(tuán))交聯(lián)的聚甲基丙烯酸酯樹(shù)脂基是合適的。L26:丁基硅烷化學(xué)鍵合到完全多孔或表面多孔的二氧化硅顆粒上,直徑1.5至10 ??m。L28:一種多功能載體,由高純度100埃、與陰離子交換劑結(jié)合的球形二氧化硅基質(zhì),由常規(guī)胺基以及C8基團(tuán)組成。L29:由g-氧化鋁、反相低碳重量百分比,氧化鋁聚丁二烯球形顆粒組成,直徑5μm 和80埃的孔隙體積。L30:乙基硅烷化學(xué)鍵合到全多孔硅顆粒,直徑3-10μm。L31:一種氫氧化物選擇性強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂季胺類(lèi)樹(shù)脂,結(jié)合在乳膠粒子上,該乳膠粒子附著在8.5μm大孔粒子的芯上,該大孔粒子的孔徑為2000埃,由與55%二乙烯苯交聯(lián)的乙烯基苯組成。L32:一種手性配體交換樹(shù)脂,L-脯氨酸銅絡(luò)合物共價(jià)鍵合到直徑為5-10μm的不規(guī)則形狀的二氧化硅顆粒上。L33:4000-500000道爾頓范圍內(nèi)按分子大小鍵合在球形硅膠上,可用于分離葡萄糖。L34:強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由磺化交聯(lián)的苯乙烯-二乙烯苯共聚物(鉛型)組成,直徑7-9μm。L35:一種鋯穩(wěn)定球形二氧化硅填料,其具有孔徑為150埃的親水(二醇型)分子單層鍵合相。L36:一種L-苯基甘氨酸的3,5-二硝基苯甲酰衍生物,共價(jià)鍵合到5-μm氨基丙基二氧化硅上。L37:能夠在2000-40000道爾頓范圍內(nèi)按分子大小分離蛋白質(zhì),它是一種聚甲基丙烯酸酯凝膠。L38:一種用于水溶性樣品分離的甲基丙烯酸鹽基分子排阻柱子。L39:全多孔球形樹(shù)脂的親水性聚羥甲基丙烯酸酯凝膠。L40:纖維素Tris-3,5-二甲基苯氨基甲酸酯涂層多孔二氧化硅顆粒,直徑3-20 ??m。L41:球形二氧化硅顆粒上固定化α1酸糖蛋白,直徑為5μm。L42:辛基硅烷和十八烷基硅烷基,以化學(xué)方式鍵合至直徑為5μm之多孔硅膠上。L43:五氟苯基通過(guò)直徑為1.5至10μm的丙基片段與二氧化硅顆粒化學(xué)結(jié)合。L44:一種多功能載體,由高純度、60埃、與陽(yáng)離子交換劑結(jié)合的球形二氧化硅基質(zhì)、有磺酸功能基及常規(guī)反相C8功能組成。L45:β-環(huán)糊精,R,S-羥丙基醚衍生物,與多孔二氧化硅顆粒結(jié)合,直徑3-10 ??m。L46:聚苯乙烯/二乙烯基苯基底,與季胺類(lèi)功能化乳膠珠結(jié)合,直徑約9μm至11μm。L47:大容量陰離子交換微孔基質(zhì),含全功能化三甲胺基,直徑8μm。L48:磺化交聯(lián)聚苯乙烯,外層為亞微米、多孔、陰離子交換微球,直徑5-15μm。L49:一種反相填料,通過(guò)在直徑為3至10μm的球形多孔氧化鋯顆粒上涂上一薄層聚丁二烯制成。L50:具有反相保持和強(qiáng)陰離子交換功能的多功能樹(shù)脂。樹(shù)脂由乙烯基苯組成,55%與二乙烯基苯共聚物交聯(lián),直徑3-15 ??m,表面積不小于350 m2/g?;w涂有季銨功能化乳膠粒子,由苯乙烯與二乙烯基苯交聯(lián)而成。L51:直鏈淀粉 tris-3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯涂層,多孔球形二氧化硅顆粒,直徑3-10 ??m。L52:一種強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由具有磺丙基或磺甲基的多孔二氧化硅制成,直徑1到10 ??m。L53:弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由乙烯基苯組成,55%與二乙烯基苯共聚物交聯(lián),直徑3~15μm。基質(zhì)表面接枝羧酸和/或磷酸官能化單體。容量不小于500μEq/柱。L54:一種尺寸排阻介質(zhì),由葡聚糖與高度交聯(lián)的多孔瓊脂糖珠共價(jià)鍵合而成,直徑5-15 ??m。L55:一種強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由涂有聚丁二烯-馬來(lái)酸共聚物的多孔二氧化硅制成,直徑約5μm。L56:丙基硅烷化學(xué)方式結(jié)合至直徑為3至10 ??m的完全或表面多孔硅膠上。L57:一種手性識(shí)別蛋白、卵球形粘液化學(xué)結(jié)合到二氧化硅顆粒上,直徑約5μm,孔徑為120埃。L58:強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由磺化交聯(lián)的苯乙烯-二乙烯苯共聚物構(gòu)成,呈鈉型,直徑約6-30μm。L59:能夠在5-7000 kDa范圍內(nèi)以分子量分離蛋白質(zhì),填料為球形1.5-10μm二氧化硅或具有親水涂層的混合填料。L60:球形多孔硅膠,直徑為10μm或更小,其表面已與烷基酰胺基團(tuán)共價(jià)改性并封端。L61:一種氫氧化物選擇性強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂,由孔徑小于10埃的13 ??m微孔顆粒的高度交聯(lián)芯組成,由與55%二乙烯苯交聯(lián)的乙烯基苯組成,乳膠涂層由直徑為85納米的微生物組成。與烷醇季銨離子(6%)鍵合的EADS。L62:C30硅烷鍵合在直徑3至15μm的全多孔球形二氧化硅上。L63:糖肽替考拉寧通過(guò)多重共價(jià)鍵連接到一個(gè)100埃的球形二氧化硅上。L64:強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂,由8%交聯(lián)苯乙烯-二乙烯基苯共聚物和季銨基氯形成,直徑45-180 ??m。L65:強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由2%磺化交聯(lián)苯乙烯-二乙烯基苯共聚物和一個(gè)氫型磺酸基組成,直徑63-250μm。L66:在5μm粒徑硅膠基底上涂覆冠醚,活性部位為(S)-18-冠-6-醚。L67:帶有C18烷基的多孔乙烯醇共聚物,連接到聚合物的羥基上,直徑2到10μm。L68:球形多孔二氧化硅,直徑10μm或更小,其表面經(jīng)烷基酰胺基共價(jià)修飾和未封端。L69:乙烯基苯/二乙烯基苯基質(zhì)與季胺類(lèi)功能化130納米乳膠珠聚合,直徑約6.5 ??m。L70:纖維素三(苯基氨基甲酸酯)涂層在5μm二氧化硅上。L72:(S)-苯甘氨酸和3,5-二硝基萘-尿素鍵共價(jià)鍵合到二氧化硅上。L73:一種剛性球形聚二乙烯苯顆粒,直徑5至10μm。L74:一種強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂,由具有100埃平均孔徑的7 ??m大孔顆粒的高度交聯(lián)芯組成,由與55%二乙烯苯交聯(lián)的乙烯基苯和接枝到表面的陰離子交換層組成,其功能化基團(tuán)為烷基季銨離子。L75:一種手性識(shí)別蛋白,牛血清白蛋白(BSA)化學(xué)鍵合于二氧化硅顆粒,直徑約為7μm,孔徑為300埃。L76:硅基弱陽(yáng)離子交換材料,直徑5μm。底物是表面聚合的聚丁二烯馬來(lái)酸,以提供羧酸功能。容量不小于29μeq/柱。L77:弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由乙烯基苯組成,55%與二乙烯基苯共聚物交聯(lián),直徑6-9μm?;|(zhì)表面接羧酸官能團(tuán),容量不小于500μeq/柱(4 mm x 25 cm)。L78:一種硅烷配體,由反相(一個(gè)比C8長(zhǎng)的烷基鏈)和陰離子交換(一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)或四分之一氨基)官能團(tuán)組成,這些官能團(tuán)通過(guò)化學(xué)方式結(jié)合到多孔或非多孔的二氧化硅微粒上,直徑為1.0到50μm,或?yàn)檎w柱。L79:一種手性識(shí)別蛋白,人血清白蛋白(HSA)化學(xué)鍵合在二氧化硅顆粒上,直徑約5μm。L80:纖維素tris-(4-甲基苯甲酸酯)涂層,多孔球形二氧化硅顆粒,直徑5-20??m。L81:一種氫氧化物選擇性強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂,由9 ??m多孔顆粒的高度交聯(lián)芯組成,孔徑為2000埃,由乙烯基苯與55%二乙烯基苯交聯(lián)而成,乳膠涂層由70納米直徑的微球(6%)組成。交聯(lián))與烷醇季銨離子結(jié)合。L82:聚胺與交聯(lián)聚乙烯醇聚合物化學(xué)鍵合,直徑5μm。L83:一種氫氧化物選擇性強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂四分之一胺,結(jié)合在乳膠粒子上,該乳膠粒子附著在具有10埃孔徑的10.5μm微孔粒子芯上,由與55%二乙烯苯交聯(lián)的乙烯基苯組成。L84:弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂,由乙烯基苯組成,55%與二乙烯基苯共聚物交聯(lián),直徑5μm?;|(zhì)表面接枝羧酸官能團(tuán)。容量不小于8400μeq/柱(5 mm x 25cm)。L85:一種硅烷配體,由反相(一個(gè)比C8長(zhǎng)的烷基鏈)和弱陽(yáng)離子交換(羧基)官能團(tuán)組成,它們通過(guò)化學(xué)方式結(jié)合到直徑為1.0到50 ??m的多孔或非多孔顆粒上。L86:熔融的核粒子與高度極化的配體,具有多個(gè)羥基在硅膠外層,直徑1.5至5μm。L87:十二烷基硅烷化學(xué)鍵合到多孔或表面多孔的二氧化硅顆粒上,1.5到10μm。L88:糖肽萬(wàn)古霉素通過(guò)多重共價(jià)鍵與100-200埃的球形二氧化硅相連。L89:用于中性和陰離子水溶性聚合物的填料,具有分離分子量在100-3000(由聚氧化乙烯測(cè)定)之間的化合物的能力。是一種聚甲基丙烯酸酯樹(shù)脂基,與聚羥基醚交聯(lián)(表面含有一些殘留的陽(yáng)離子官能團(tuán))。L90:直鏈淀粉tris-[(s)-α-甲基芐基氨基甲酸酯]包覆在直徑為3-10μm的多孔球形二氧化硅顆粒上。L91:一種強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂,由單分散多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯珠與季胺偶聯(lián)而成,珠子尺寸為3-10 ????m。L92:一種強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂,由具有100埃平均孔徑的5-9??m大孔顆粒的高度交聯(lián)芯組成,由與55%二乙烯苯交聯(lián)的乙烯基苯和接枝到表面的陰離子交換層組成,其功能化基團(tuán)為烷醇季銨離子。L93:纖維素tris-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)反相手性固定相涂覆在3或5μm ??m硅膠顆粒上。L94:一種強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂
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