作為有機僧的獨門絕技——柱色譜，確實是必須學會掌握的一門技藝，而且應該日月精進！
那么，這們?nèi)绾沃匾募妓?，有沒有什么武學秘籍呢？作為一門實驗學科，理論的指導作用也在與日俱增。因此，柱色譜當然也被人們進行了深入的研究。接下來，咱們進入主題：快速柱色譜分離技術
快速柱色譜
J.Org. Chem., 1978, 43, 2923-2925報道了快速柱色譜分離技巧。具體的過程如下：
首先，展開劑的選擇。通過TLC（薄層色譜）確定展開劑，展開劑應該使目標化合物在TLC上的Rf值為0.30-0.35。這樣可以獲得良好的分離。
其次，色譜柱的選擇。根據(jù)所需分離物質(zhì)質(zhì)量或者體積，選擇適宜大小和長度的色譜柱，裝填上10-15 cm高的硅膠。表I給出一些經(jīng)驗值，可以根據(jù)該表進行選擇。
接著，潤洗與排氣。使用選定的展開劑（洗脫劑）沖洗色譜柱，排出硅膠中的氣體。
最后，裝填上樣品，使用展開劑以6 cm/min的速度進行洗脫。
通常，15分鐘以內(nèi)即可完成分離純化。
當然，具體問題需要具體分析。我們應該明白，方法是死的，人是活的，而實驗也是千差萬別的，故混合物的分離純化也無窮盡。因此，掌握了基本法之后，也應該對應實驗要求，對方法進行靈活變化。
所以，如今我們不僅有常壓、加壓柱，也有減壓柱，柱子大小、長短規(guī)格多樣，硅膠50-500目等多種型號，裝柱與上樣都可以分為干法與濕法，并且還有了自動化過柱機。
當然，即便如此多的選擇，作為有機人，還是應該嫻熟地掌握快速柱色譜分離技藝。
TLC
那么，TLC又應該如何使用呢？
相對于柱色譜，TLC應該是化學反應中必須掌握的入門技。TLC具有微量、快速、簡單、節(jié)省等特點。通過TLC，我們可以非?？焖俚孬@得反應有關的大量信息：反應速度、原料轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)物產(chǎn)量、反應復雜程度、分離難以、各化合物極性大小等等。
那么，我們怎么進行TLC監(jiān)測反應呢？
首先，需要原料留樣。在TLC板上距離底部0.5 cm使用鉛筆畫一條線，間隔0.3～0.5 cm點上4～6個點。從左到右依次點上稀釋了的原料樣。反應液取樣稀釋，點上一個與原料的混合點，一個單點(如圖1)。點板可選的毛細管通常有兩種：0.3 mm的用于有機相，0.5 mm用于點水相。
隨后，嘗試使用常用的展開劑進行展開。如圖 1，雖然也起到了分離鑒別等作用，但是原料與產(chǎn)物Rf值較大，應該繼續(xù)更換更小極性的展開劑進行展開，以使產(chǎn)物的Rf值在0.2～0.35之間為宜。常用展開劑極性大小順序為：
石油醚<二氯甲烷<乙醚<四氫呋喃<乙酸乙酯<丙酮<正丙醇<甲醇<水
Fig. 1
因此，一般極性的化合物，通常使用PE/EA體系；極性較大的化合物，則選擇DCM/MeOH體系。對于胺類化合物，在展開劑中加入0.1%三乙胺；對于含羧基的化合物，加0.1%的乙酸，這樣可以有效地消除拖尾現(xiàn)象。
然后，在紫外燈下進行顯色（254 nm、365 nm），如果化合物顯色不明顯，那么可以使用合適的顯色劑進行顯色后在觀測。
通常，先使用碘缸進行顯色。這是因為碘顯色可逆，等待碘揮發(fā)后，TLC板還可以使用其他顯色劑進行進一步顯色。常用的有高錳酸鉀、濃硫酸、磷鉬酸等。
顯色可以歸納為四字訣：看、照、碘、顯。即：
一看、首先在日光下觀察，劃出有色物質(zhì)的斑點位置
二照、在紫外燈下觀察有無暗斑或熒光斑點
三碘、大部分有機物會吸附碘可逆的產(chǎn)生棕色或黃色斑點
四顯、既無色又無紫外吸收的物質(zhì)，可以用顯色劑顯色
TLC是有機合成工作者的眼睛，因此每位有機化學工作者都應該熟能生巧地運用TLC進行科學研究。
參考
J.Org. Chem., 1978, 43, 2923-2925
《柱子歌》全文：
人生何事最艱難，有機屌絲讀了研。
兩寸硅膠爬歲月，三根柱子過流年。 君不見， 停了反應爬塊板，一跑跑出十個點。 極性基本差不多，目標產(chǎn)物找瞎眼。 硬著頭皮裝硅膠，咬牙裝到兩尺高。 就為這根破柱子，多少博士盡折腰。 不敢加壓慢慢流，展開比例最溫柔。 心中祈禱一千遍，過出產(chǎn)物更何求。 想著長征二萬五，終于熬過上下午。 滿心期待盼它純，紫外燈前一聲苦。 君不見， 這鍋反應真拔群，沒有雜點太喜人。 隨手裝根小柱子，趕緊過完要出門。 終于過出產(chǎn)物點，一收收了三十管。 我和伙伴都驚呆，旋蒸蒸到淚滿臉。 那瓶粗品點挺濃，一過柱子影無蹤。 產(chǎn)物人間蒸發(fā)了？剩我凌亂在風中。 此間辛酸說不盡，有限光陰無限恨。 可憐辜負好韶光，損身傷體無人問。 乙酸乙酯滿屋香，甲醇丙酮斷人腸。 石油醚兮如洗手，二氯甲烷又何妨。 誤吸硅膠得塵肺，說多滿滿都是淚。 用生命在搞科研，工資基本像安慰。 問君可有女盆友？指指柱子不開口。 大好青春付與它，哪有妹子肯牽手。 朝夕相伴久生情，再看柱子也婷婷。 冰肌玉骨膚如雪，只手堪握柳腰輕。 冷眼相對她不惱，惡語相加她不吵。 萬般心事她都聽，不怕到頭跟人跑。 想找妹子如做夢，看到女神徒心動。 且伴柱子過殘生，這種領悟多么痛。 又是一年春花開，夏月秋風次第來。 冬雪紛紛漫天舞，良人仍在實驗臺。 實驗室外風光好，實驗室里博士老。 柱子閃亮總?cè)缧?，年華已舊白發(fā)早。 腿軟眼花耳不靈，前路昏昏夢不成。 亂語胡言君莫笑，人生不易有機僧。
http://muchong.com/html/201308/6234225.html
