圖片來(lái)源：Chem. Sci.
近期，日本北海道大學(xué)Tohru Dairi和Yasushi Ogasawara課題組報(bào)道了Lasso肽MS-271中C端D-色氨酸的引入機(jī)制。他們前期工作中已鑒定了MS-271的生物合成基因簇，異源表達(dá)表明該基因簇包含所有MS-271合成基因，在基因簇中沒(méi)有鑒定到負(fù)責(zé)D-Trp合成的基因，而基因簇中唯一未知功能基因mslH被認(rèn)為是最有可能負(fù)責(zé)合成D-Trp的基因。
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為了驗(yàn)證這一猜測(cè)，首先驗(yàn)證mslH的體內(nèi)功能。將mslH與前體肽編碼基因mslA及其相關(guān)基因mslB1在大腸桿菌中共表達(dá)，質(zhì)譜檢測(cè)到了含D-Trp的前體肽MslA。
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接著，將MslA、MslB1和MslH分別進(jìn)行體外表達(dá)獲得可溶性蛋白。將三個(gè)蛋白混合反應(yīng)，隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)，檢測(cè)到的含D-Trp的MslA產(chǎn)物越多。
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將MslA的C端進(jìn)行突變，MslH分別催化MslA突變體。檢測(cè)結(jié)果表明，MslH可識(shí)別其他氨基酸（F和Y）催化形成D-氨基酸，具有廣泛的底物譜，但是催化位點(diǎn)相鄰兩個(gè)位點(diǎn)即MslA突變體C末端基序一定是“CFX”才能被識(shí)別。
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該研究結(jié)果還表明，MslH催化MslA全長(zhǎng)，說(shuō)明MslH異構(gòu)化是在MslA發(fā)生水解之前。據(jù)此，對(duì)MS-271的生物合成途徑進(jìn)行了合理推測(cè)。
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參考文獻(xiàn)：Identification of the peptide epimerase MslH responsible for D-aminoacid introduction at the Cterminus of ribosomal peptides
Chem. Sci.
DOI：10.1039/d0sc06308h
原文作者：Zhi Feng, Yasushi Ogasawara * and Tohru Dairi *
