第一作者： Kangqiang Qiu, Aditya Yadav, Zhiqi Tian
通訊作者： Chayan K. Nandi，Jiajie Diao通訊單位： Indian Institute of Technology Mandi為了對(duì)溶酶體進(jìn)行超長(zhǎng)期的研究，本文采用生物相容性蛋白質(zhì)牛血清白蛋白（BSA）修飾的貴金屬金和銀納米簇（MNC），稱為BSA?NCs，在結(jié)構(gòu)照明顯微鏡（SIM）下對(duì)溶酶體進(jìn)行成像。與商業(yè)溶酶體染料相比，BSA?NCs在pH波動(dòng)方面表現(xiàn)出優(yōu)異的抗干擾性，在超長(zhǎng)時(shí)間跟蹤溶酶體方面表現(xiàn)出高效的抗光漂白能力以及近紅外熒光性能。在SIM下用BSA-NCs觀察溶酶體變化，以及溶酶體和線粒體誘導(dǎo)有絲分裂之間的相互作用。BSA-Au-NCs具有類分子的性質(zhì)和近紅外熒光特性，被證明能夠進(jìn)入器官的內(nèi)部細(xì)胞，并首次應(yīng)用于跟蹤亞細(xì)胞溶酶體動(dòng)力學(xué)。研究結(jié)果不僅表明利用超分辨率技術(shù)對(duì)活細(xì)胞和類器官中的細(xì)胞器進(jìn)行成像是一種很好的工具，而且還突出了將MNC用于超長(zhǎng)期生物成像的新領(lǐng)域。
圖1：BSA?NCs的合成與表征：（a）BSA?Au NCs的合成途徑；（b）BSA?Au NCs的透射電鏡圖像和（c）BSA?Ag NCs，插圖顯示團(tuán)簇的尺寸分布。（d）BSA?Au NCs和（g）BSA?Ag NCs的吸收波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)。不同pH值緩沖液中的（e）BSA?Au NCs（663 nm處）和（h）BSA?Ag NCs（622 nm處）的歸一化熒光強(qiáng)度。（f）BSA?Au-NCs（663 nm處）和（i）BSA?Ag-NCs（622 nm）在多種離子和生物活性中性的氨基酸的水中的熒光強(qiáng)度。F0是去離子水中的發(fā)射強(qiáng)度。
圖2：BSA?NCs的生物相容性和細(xì)胞定位。（a）不同濃度的BSA?Au NCs和（b）BSA?Ag-NCs與HeLa細(xì)胞作用24小時(shí)和的細(xì)胞活性。（c）用LTR和BSA?NCs染色的HeLa細(xì)胞的SIM圖像。（d，e）經(jīng)MTG和BSA?Au-NCs染色的正常（圖（d））和FIP200 KO（圖（e））淋巴管肉瘤細(xì)胞的SIM圖像，用或不用CCCP（20μM）處理24小時(shí)。對(duì)于BSA?Au-NCs，濃度為3.0mg/mL；對(duì)于BSA?Ag-NCs，濃度為0.2 mg/mL。
圖3:BSA?NCs的光穩(wěn)定和pH波動(dòng)的抗干擾性。（a） HeLa細(xì)胞經(jīng)BSA染色在100%激光功率下（LTR為561 nm，BSA-NCs為640 nm）進(jìn)行第一次和第六次的SIM圖像。（b））100%激光功率BSA?NCs和LTR（LTR為561 nm，BSA-NCs為640 nm不同成像時(shí)間下的的歸一化熒光強(qiáng)度。（c，d）用或不用（c）氯喹（100μM，30分鐘）和（d）4%多聚甲醛（
