急性細(xì)胞排斥反應(yīng)（ACR）是實(shí)體器官移植后最常見的早期免疫排斥反應(yīng)之一，是移植物衰竭和移植受者死亡的重要危險(xiǎn)因素。當(dāng)前，臨床上仍缺乏可靠的無創(chuàng)檢測指標(biāo)用于急性細(xì)胞排斥反應(yīng)的診斷。細(xì)胞外囊泡（EVs）廣泛參與細(xì)胞間通訊，在生理過程和疾病進(jìn)展中發(fā)揮著不可替代的作用，可作為疾病診斷的標(biāo)志物。此外，來自同一親本細(xì)胞的EV亞群，其物理特性和內(nèi)容物可能存在差異。目前，EV亞群的分離方法通?；诔叽?、密度和蛋白表達(dá)量，掩蓋了EV表面蛋白的結(jié)構(gòu)和寡聚狀態(tài)等信息。當(dāng)ACR發(fā)生時(shí)，T細(xì)胞膜上的TCR-CD3復(fù)合體聚集是CD3構(gòu)象變化和T細(xì)胞激活的必要條件。因此，為了更準(zhǔn)確地描述T細(xì)胞來源的EV亞群在排斥反應(yīng)中發(fā)揮的作用，并尋找新的急性細(xì)胞排斥反應(yīng)生物標(biāo)志物，迫切需要更精確的方法來分離T細(xì)胞在不同狀態(tài)下分泌的EVs。
近日，中山大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院的戴宗教授團(tuán)隊(duì)和中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院肝臟外科暨肝移植中心的楊揚(yáng)教授團(tuán)隊(duì)合作，首次提出了一種基于核酸適配體修飾納米金的卡尺策略，成功實(shí)現(xiàn)了結(jié)構(gòu)異質(zhì)的TCR-CD3單體和二聚體EV亞群的分離和異質(zhì)性分析。
作者通過構(gòu)建小鼠急性細(xì)胞排斥反應(yīng)模型，從小鼠血漿中分離得到了兩個(gè)T細(xì)胞來源的EV亞群，并對(duì)其進(jìn)行了表型鑒定和測序分析。結(jié)果表明：TCR-CD3二聚體EVs的CD3表達(dá)量更多，顆粒尺寸更大。在TCR-CD3單體EVs表達(dá)上調(diào)的11個(gè)microRNAs中，有7個(gè)被報(bào)道在發(fā)生ACR的患者中與免疫激活和促進(jìn)炎癥反應(yīng)相關(guān)，其靶基因在T細(xì)胞激活和免疫系統(tǒng)的細(xì)胞因子信號(hào)中顯著富集。該結(jié)果提示TCR-CD3單體EVs是ACR潛在的無創(chuàng)檢測標(biāo)志物，并為基于蛋白寡聚狀態(tài)區(qū)分EV亞群提供了有效參考。 該卡尺策略為解構(gòu)EV亞群的異質(zhì)性開辟了新的方向，有望通過改變卡尺探針的序列和間距應(yīng)用于更廣泛的蛋白質(zhì)異構(gòu)EV亞群研究。 論文信息 Isolation of Structurally Heterogeneous TCR-CD3 Extracellular Vesicle Subpopulations Using Caliper Strategy Dr. Wen Yin, Dr. Haitian Chen, Dr. Jianye Cai, Xing Huang, Dr. Lang Zhang, Dr. Yuzhi Xu, Dr. Jun Zheng, Dr. Si-Yang Liu, Prof. Xiaoyong Zou, Prof. Zong Dai, Prof. Yang Yang 文章的第一作者為中山大學(xué)的殷文博士和中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院的陳海填博士后（共同一作），通訊作者為中山大學(xué)的戴宗教授、柳思揚(yáng)副研究員和中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院的鄭俊博士。 Angewandte Chemie International Edition DOI: 10.1002/anie.202300954
