分享一篇發(fā)表在JACS上的文章,文章的題目是“Affinity-Driven Aryl Diazonium Labeling of Peptide Receptors on Living Cells”,通訊作者是來自美國內(nèi)布拉斯加大學(xué)的James W. Checco助理教授。研究方向是細(xì)胞間信號分子的神經(jīng)肽和肽激素。
肽-受體互作在多種生理過程中發(fā)揮功能,因此開發(fā)生物活性肽共價標(biāo)記活細(xì)胞表面受體的方法有重要意義?;诖?,作者開發(fā)了一種親和力驅(qū)動的芳基重氮化標(biāo)記方法,用于在活細(xì)胞表面標(biāo)記多肽受體。作者設(shè)計了含有芳基重氮基團的神經(jīng)緊張肽,并發(fā)現(xiàn)其能共價標(biāo)記活細(xì)胞表面相應(yīng)的G蛋白偶聯(lián)受體。此外,作者證實這種標(biāo)記由肽與受體的親和力驅(qū)動,并且依賴于肽結(jié)合位點的特異序列。此后,作者展示了這種標(biāo)記方法的普適性,可以適用于不同的肽-受體系統(tǒng),例如胰高血糖素樣肽及其受體,并且可以通過熒光顯微鏡觀察到標(biāo)記的受體定位于細(xì)胞表面。此外,還可以和質(zhì)譜聯(lián)用,富集和鑒定多肽的互作受體。總之,芳基重氮基尺寸較小,整合進(jìn)多肽容易,且對其敏感的酪氨酸和組氨酸在受體的肽結(jié)合位點上豐度高,因此這種親和力驅(qū)動的芳基重氮化標(biāo)記方法可以用于監(jiān)測受體在活細(xì)胞中的動態(tài)變化,有助于發(fā)展新的化學(xué)探針來研究肽信號傳導(dǎo)或發(fā)現(xiàn)新的肽-受體相互作用。原文鏈接:https://doi.org/10.1021/jacs.4c04672文章引用:10.1021/jacs.4c04672