推薦一篇發(fā)表在Nature Communications上的文章，其標(biāo)題是“Proximity interactome of lymphatic VE-cadherin reveals mechanisms of junctional remodeling and reelin secretion”。本文通訊作者是來自北卡羅來納大學(xué)教堂山分校的Kathleen M. Caron教授，其課題組致力于胃腸道淋巴管中的GPCR功能的探索與研究。本文中，作者基于定量蛋白質(zhì)組學(xué)與鄰近標(biāo)記策略，設(shè)計(jì)并建立了一個(gè)血管內(nèi)皮-鈣粘蛋白動(dòng)態(tài)相互作用研究平臺，揭示了細(xì)胞粘附重塑的核心機(jī)制。
血管內(nèi)皮（VE）-鈣粘蛋白是內(nèi)皮粘附連接的核心成分，對于內(nèi)皮細(xì)胞的通透性和血管的完整性來說極其重要。此前的研究中，研究者暗示了VE-鈣粘蛋白具有參與多種相互作用網(wǎng)絡(luò)的潛力，但其具體相互作用組仍未能有效解析。為了解決這一問題，本文中，作者首先建了基于鄰近標(biāo)記的相互作用蛋白定量分析策略。此前的研究中，基于BioID的鄰近標(biāo)記策略為相互作用蛋白的解析提供了新的角度。由此，本文研究者在淋巴內(nèi)皮細(xì)胞（LEC）中引入了融合表達(dá)了Turbo和miniTurbo的VE-鈣粘蛋白。初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，miniTurbo具有較高的時(shí)間分辨率，且具有較低的背景，因此他們將其應(yīng)用于后續(xù)的研究中。同時(shí)，考慮到通常情況下， VE-鈣粘蛋白存在兩種獨(dú)特的排列構(gòu)象，即具有滲透性的不連續(xù)連接型和具有較低滲透能力的連續(xù)型連接。由此，為了對VE-鈣粘蛋白的相互作用組進(jìn)行全面的研究，研究者使用腎上腺髓質(zhì)素（AM）對此構(gòu)象重塑轉(zhuǎn)化前后的相互作用組進(jìn)行研究。經(jīng)過篩選，他們發(fā)現(xiàn)，AM處理前后發(fā)現(xiàn)了大量關(guān)于分泌囊泡和GTP酶活性相關(guān)的事件，由此暗示了這些通路在細(xì)胞粘附重塑機(jī)制中的重要作用。通過基于小分子藥物的阻斷，他們發(fā)現(xiàn)，內(nèi)吞作用和再循環(huán)的抑制確實(shí)會顯著地影響VE-鈣粘蛋白的脂膜積累。最后，他們發(fā)現(xiàn)，分泌糖蛋白Reelin在VE-鈣粘蛋白相互作用組中具有特異性顯著地富集，于是他們對此進(jìn)行了深入研究。結(jié)果顯示，VE-鈣粘蛋白的敲除會顯著地影響Reelin蛋白的豐度，并進(jìn)一步影響Reelin的分泌，由此建立VE-鈣粘蛋白和Reelin之間的生物學(xué)聯(lián)系。綜上，本文中，作者設(shè)計(jì)并構(gòu)建了基于鄰近標(biāo)記的血管內(nèi)皮-鈣粘蛋白相互作用組的定量解析，闡明了血管內(nèi)皮-鈣粘蛋白與細(xì)胞粘附重塑機(jī)制之間的聯(lián)系，并揭示了血管內(nèi)皮-鈣粘蛋白相關(guān)的Reelin的積累與分泌機(jī)制，為后續(xù)心血管疾病的治療提供了潛在診斷生物標(biāo)志物。本文鏈接：https://www.nature.com/articles/s41467-024-51918-1原文引用：DOI: 10.1038/s41467-024-51918-1
